Օստեոարթրիտը (ՕԱ) ոսկրային հոդերի երկարատև քրոնիկ դեգեներատիվ հիվանդություններից մեկն է, որն ազդում է 65-ից բարձր տարիքի բնակչության վրա [
1]։ Ընդհանուր առմամբ, OA հիվանդների մոտ ախտորոշվում է վնասված աճառ, բորբոքված synovium և էրոզիայի ենթարկված խոնդրոցիտներ, որոնք առաջացնում են ցավ և ֆիզիկական անհանգստություն:
2]։ Արթրիտային ցավը հիմնականում առաջանում է բորբոքման հետևանքով հոդերի աճառի դեգեներացիայից, և երբ աճառը լրջորեն վնասված է ոսկորները կարող են բախվել միմյանց՝ առաջացնելով անտանելի ցավ և ֆիզիկական դժվարություններ [
3]։ Բորբոքային միջնորդների ներգրավվածությունը ախտանիշներով, ինչպիսիք են ցավը, այտուցը և հոդի կարծրությունը, լավ փաստագրված է: OA հիվանդների մոտ synovial հեղուկում հայտնաբերվում են բորբոքային ցիտոկիններ, որոնք առաջացնում են աճառի և ենթախոնդրալ ոսկորների էրոզիա [
4]։ Երկու հիմնական գանգատները, որոնք սովորաբար ունենում են OA հիվանդները, ցավն ու synovial բորբոքումն են: Հետևաբար, OA-ի ներկայիս թերապիայի առաջնային նպատակներն են նվազեցնել ցավը և բորբոքումը: [
5]։ Թեև OA-ի հասանելի բուժումները, ներառյալ ոչ ստերոիդային և ստերոիդային դեղամիջոցները, ապացուցված են արդյունավետություն ցավն ու բորբոքումը թեթևացնելու համար, այդ դեղերի երկարատև օգտագործումը լուրջ առողջական հետևանքներ է ունենում, ինչպիսիք են սրտանոթային, ստամոքս-աղիքային և երիկամային դիսֆունկցիաները [
6]։ Այսպիսով, օստեոարթրիտի բուժման համար պետք է մշակվի ավելի արդյունավետ դեղամիջոց՝ ավելի քիչ կողմնակի ազդեցություններով:
Բնական առողջապահական արտադրանքները գնալով ավելի տարածված են դառնում անվտանգ և հեշտ հասանելի լինելու համար [
7]։ Ավանդական կորեական դեղամիջոցներն ապացուցել են արդյունավետությունը մի քանի բորբոքային հիվանդությունների դեմ, ներառյալ արթրիտը [
8]։ Aucklandia lappa DC. հայտնի է իր բուժիչ հատկություններով, ինչպիսիք են qi-ի շրջանառությունը ուժեղացնելը ցավը թեթևացնելու և ստամոքսը հանգստացնելու համար և ավանդաբար օգտագործվել է որպես բնական ցավազրկող [
9]։ Նախորդ զեկույցները վկայում են, որ A. lappa-ն ունի հակաբորբոքային [
10,
11], ցավազրկող [
12], հակաքաղցկեղային [
13] և գաստրոպաշտպանիչ [
14] էֆեկտներ։ A. lappa-ի տարբեր կենսաբանական գործունեությունը պայմանավորված է նրա հիմնական ակտիվ միացություններով՝ կոստունոլիդ, դեհիդրոկոստուս լակտոն, դիհիդրոկոստունոլիդ, կոստուսլակտոն, α-կոստոլ, սուսուրեա լակտոն և կոստուսլակտոն [
15]։ Ավելի վաղ ուսումնասիրությունները պնդում են, որ կոստունոլիդը հակաբորբոքային հատկություններ է ցույց տվել լիպոպոլիսաքարիդում (LPS), որը մակրոֆագներին դրդել է NF-kB-ի և ջերմային շոկի սպիտակուցի ուղու կարգավորման միջոցով [
16,
17]։ Այնուամենայնիվ, ոչ մի ուսումնասիրություն չի ուսումնասիրել A. lappa-ի հնարավոր գործունեությունը OA բուժման համար: Սույն հետազոտությունը ուսումնասիրել է A. lappa-ի թերապևտիկ ազդեցությունը OA-ի դեմ՝ օգտագործելով (monosodium-iodoacetate) MIA և քացախաթթվով առաջացած կրծողների մոդելները:
Մոնոսոդիում-յոդոացետատը (MIA) հայտնի է որպես կենդանիների ցավային վարքագծի և OA-ի պաթոֆիզիոլոգիական առանձնահատկությունների առաջացման համար [
18,
19,
20]։ Ծնկների հոդերի մեջ ներարկվելիս MIA-ն խաթարում է խոնդրոցիտների նյութափոխանակությունը և առաջացնում է բորբոքում և բորբոքային ախտանիշներ, ինչպիսիք են աճառը և ենթախոնդրալ ոսկրերի էրոզիան, OA-ի հիմնական ախտանիշները [
18]։ Քացախաթթվով առաջացած գրգռման պատասխանը լայնորեն դիտվում է որպես ծայրամասային ցավի մոդելավորում կենդանիների մոտ, որտեղ բորբոքային ցավը կարող է քանակապես չափվել [
19]։ Մկնիկի մակրոֆագի բջջային գիծը՝ RAW264.7, լայնորեն օգտագործվում է բորբոքմանը բջջային արձագանքներն ուսումնասիրելու համար: LPS-ով ակտիվանալուց հետո RAW264 մակրոֆագները ակտիվացնում են բորբոքային ուղիները և արտազատում մի քանի բորբոքային միջնորդներ, ինչպիսիք են՝ TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS և IL-6 [
20]։ Այս ուսումնասիրությունը գնահատել է A. lappa-ի հականոցիցեպտիվ և հակաբորբոքային ազդեցությունը OA-ի դեմ MIA կենդանական մոդելում, քացախաթթվով առաջացած կենդանական մոդելում և LPS-ակտիվացված RAW264.7 բջիջներում:
2. Նյութեր և մեթոդներ
2.1. Բուսական նյութ
A. lappa-ի չորացած արմատը DC. Փորձի մեջ օգտագործվածը ձեռք է բերվել Epulip Pharmaceutical Co., Ltd.-ից (Սեուլ, Կորեա): Այն նույնականացրել է Գաչոնի համալսարանի Կորեական բժշկության գնդապետ, բուսական դեղաբանության բաժնի պրոֆեսոր Դոնգհուն Լին, և վաուչերի նմուշի համարը ի պահ է տրվել որպես 18060301:
2.2. HPLC Analysis of A. lappa Extract
A. lappa-ն արդյունահանվել է ռեֆլյուքս ապարատի միջոցով (թորած ջուր, 3 ժամ 100 °C-ում): Արդյունահանված լուծույթը զտվել և խտացվել է ցածր ճնշման գոլորշիչի միջոցով: A. lappa-ի քաղվածքն ունեցել է 44,69% եկամտաբերություն −80 °C-ի տակ սառնամանիքից չորացնելուց հետո: A. lappa-ի քրոմատոգրաֆիկ անալիզն իրականացվել է HPLC-ով, որը միացված է 1260 InfinityⅡ HPLC-համակարգի միջոցով (Agilent, Pal Alto, CA, USA): Քրոմատիկ տարանջատման համար EclipseXDB C18 սյունակը (4,6 × 250 մմ, 5 մկմ, Agilent) օգտագործվել է 35 °C ջերմաստիճանում: Ընդհանուր 100 մգ նմուշը նոսրացվել է 10 մլ 50% մեթանոլի մեջ և 10 րոպե լուծվել: Նմուշները զտվել են 0,45 մկմ ներարկիչի ֆիլտրով (Waters Corp., Milford, MA, USA): Շարժական փուլի բաղադրությունը 0,1% ֆոսֆորական թթու (A) և ացետոնիտրիլ (B) էր, և սյունակը մաքրվեց հետևյալ կերպ. 0–60 րոպե, 0%; 60–65 րոպե, 100%; 65–67 րոպե, 100%; 67–72 րոպե, 0% լուծիչ B 1,0 մլ/րոպե հոսքի արագությամբ: Կեղտաջրերը դիտվել են 210 նմ-ում՝ օգտագործելով 10 μL ներարկման ծավալը: Վերլուծությունը կատարվել է եռակի:
2.3. Անասնաբուծություն և կառավարում
Sprague–Dawley (SD) 5 շաբաթական արու առնետները և 6 շաբաթական արու ICR մկները գնվել են Samtako Bio Korea-ից (Gyeonggi-do, Կորեա): Կենդանիները պահվում էին սենյակում՝ օգտագործելով մշտական ջերմաստիճանը (22 ± 2 °C) և խոնավությունը (55 ± 10%) և լույսի/մութ ցիկլը 12/12 ժամ: Փորձի մեկնարկից առաջ կենդանիներին ծանոթացել են վիճակին ավելի քան մեկ շաբաթ։ Կենդանիներն ունեին կերի և ջրի ad libitum մատակարարում: Գաչոնի համալսարանում կենդանիների խնամքի և վարման ներկայիս էթիկական կանոնները (GIACUC-R2019003) խստորեն պահպանվել են կենդանիների բոլոր փորձարարական ընթացակարգերում: Հետազոտությունը մշակվել է հետազոտողի կողմից կույր և զուգահեռ փորձարկում: Մենք հետևել ենք էվթանազիայի մեթոդին՝ Կենդանիների փորձարարական էթիկայի հանձնաժողովի ուղեցույցներին համապատասխան:
2.4. ՆԳՆ ներարկում և բուժում
Առնետները պատահականորեն բաժանվել են 4 խմբի՝ կեղծ, հսկիչ, ինդոմետասին և A. lappa: Անզգայացնելով 2% իզոֆտորան O2 խառնուրդով, առնետներին ներարկվել է 50 μL MIA (40 մգ/մ; Sigma-Oldrich, St. Louis, MO, ԱՄՆ) ներհոդային ներարկային ծնկի հոդերի մեջ՝ հանգեցնելով փորձնական OA-ի: Բուժումն իրականացվել է հետևյալ կերպ. հսկիչ և կեղծ խմբերը պահպանվել են միայն AIN-93G հիմնական սննդակարգով: Միայն ինդոմետասին խմբին տրամադրվել է ինդոմետացին (3 մգ/կգ)՝ ներառված AIN-93G սննդակարգում, իսկ A. lappa 300 մգ/կգ խմբին հատկացվել է AIN-93G սննդակարգ՝ լրացված A. lappa-ով (300 մգ/կգ): Բուժումը շարունակվել է 24 օր OA ինդուկցիայի օրվանից սկսած՝ օրական 15-17 գ 190-210 գ մարմնի քաշի դիմաց:
2.5. Քաշի կրող չափում
OA ինդուկցիայից հետո առնետների հետևի վերջույթների քաշի կրող կարողության չափումը իրականացվել է անգործունակության MeterTester600-ով (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, ԱՄՆ), ինչպես նախատեսված էր: Հետևի վերջույթների վրա քաշի բաշխումը հաշվարկվել է. քաշի կրող կարողություն (%)
